⭐ 图像描述：
活细胞共聚焦成像，整个细胞呈现出圆扇形，扁平地铺展在视野中，细胞间的微管呈辐射状排列，连续、均匀、明亮。这是一张 2D 共聚焦成像时间序列，自定义颜色区分亮度，绿色代表信号较高的区域，紫色代表信号较低的区域。
⭐ 标记要点：
梯度测试染料浓度，在无明显细胞毒性情况下，尽可能增加染色浓度和时间；
使用无血清培养基染色，避免血清吸附染料，降低有效染色浓度；
使用标记辅助剂增加标记效率，抑制离子泵外排细胞内的染料；
染色完毕后使用完全培养基培养”清洗”染料 6-12 小时，使细胞吐出胞内多余染料；
细胞状态和活性极其重要，需要遵循细胞培养原则养出高活力的细胞。
hxicollege
本文素材来自ibiology 系列课程，star cellbio，EMBL，Allen istitute和平时的积累。
PS：ibiology是生物学学生的殿堂，欢迎关注ibiology～
本文的主要脉络是大伙心目中的大生物学家Ron Vale的ibio课程，解决问题的思路清晰到不行！我们就来听生物学家Ron说说，如何选择一款显微镜。🔬
本文的核心关键词有三个：解决问题 解决问题 解决问题
目录：
Part I 首先，你要问自己
Part II 是否需要荧光显微镜
Part III 如果选了荧光显微镜...
Part VI 你所关注的，不仅是荧光
PartI 首先，你需要问自己
生物学家总是会从问题出发，这是一个极其良好的思考习惯。那在真正浏览显微镜之前，你需要问自己几个问题。
单细胞形态之美，不在传统生命科学领域的讨论范围内，但却是细胞成像的命门。显微镜的出现造就了生命忠实的观察者——我们。遗憾的是，我们很少主动与被观察的细胞合作。显微成像是科学与艺术交织的高能奇点。美，是成像的基本需要。事实上，主动调控细胞形态可以满足美的需要。让生命恒美，就是表达对它的敬重。如果你能明白，显微成像是一场细胞为模特的维密秀，那么你就会知道，训练模特是必须要做的事。
本文素材来自LonelyReader，一群能带你起飞的教书匠。
此外还有自己的感悟。
开门见山，这篇文章讲的是：如果我有一个萌萌的小学妹，我会手把手教她怎么打败学术文献这头小怪兽，而不是把她踹进文献的海里看她在淹死前的苦苦挣扎...🤦♀️
哈哈，本期的核心内容，在于--
教萌萌的小学妹如何学会终极方法胖揍学术文献大魔王（师姐，学弟呢？）
目录：
Part I 读学术文献难吗？
Part II 阅读学术文献要有什么样的心态？
Part III 关于认知的认知-解释学循环
Part IV 基于解释学循环的黄金三遍定律
Part V 学会读引入段-introduction
Part VI 学会读论证段-results
Part VII 学会读讨论段-discussion
...
这篇文章来自一本书，英文写作圣经：《the Elements of Style》第四版。作者William Strunk Jr. / E. B. White。短短百页，短小精悍，字字珠玑。
豆瓣书评9.1分，这本书将会给你巨大的影响，且这些影响会随着时间不断加深。
今天所讲的的句子大多是语法正确的，但却给人一种糟糕的感觉。
没错，本篇就是要试着把感觉这种玄妙的东西讲清楚。
以便我们能从纠结于句子语法别出错，到把文章写好写漂亮。
也就是----从与语法抗争十几年的大坑里出来，到能够笔下有乾坤，写出好格调的文章来。
本文内容：封片5天后成像质量对比
整体来说，封片5天后干片样本质量依旧高于封片剂样本，这个结果与5天前直接拍摄的结果一致。
在对比图中我们可以很直观的看到，干片样本5天内亮度衰减可忽略。（但是微丝细节流失同样存在，后续有成像说明）
普通固定液相比五天前微丝细节有损失，5天后有些微丝细节已经淹没在背景之中，只不过亮度没有衰减。
微丝细节保存能力，高保真固定液显著高于普通固定液。
本文内容：
高保真微丝固定液和普通固定液以及4种封片剂对微丝细节的形貌保存的效果对比。
实验文档：
高保真微丝固定液质检报告-云文档
20260526-Product QC-高保真微丝固定液质量检测报告+干片 vs 封片对微丝的保留程度（暨 微丝固定液质检报告
[图片]
如图所示，S01及S02干片封片显著高于封片剂封片的成像信号亮度，我们可以得出结论，干片封装比封片剂封片效果更好。
从图表上看，S01与S02信号亮度相差不大，甚至使用常规固定液的S01亮度还略高于使用超分辨级高保真分辨率。重点是微丝保存的细节，高保真固定液保留的细节远多于常规固定液。我们观察下图，就能看出两种固定液的差别。
[图片]
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左侧S01细胞的微丝结构细节模糊，尤其在扇形区域基本上微丝都消失了，只剩一些粗的应力纤维。而右侧高保真固定液拍摄的微丝细节丰富，结构保存明显提升。
封片环节：
6.1 一号封片剂
第一种封片剂：
6.1.1 直接用枪头去吸，不要用滴管，精准吸出20µl，滴加在载玻片上
6.1.2 大拇指和食指捏住玻片两侧，有细胞的那一面面向自己。
6.1.3 倒扣爬片，准备让有细胞的一面贴合封片剂。用镊子轻轻侧着放下去，让爬片与有张力的液体表面先接触，爬片就会无气泡覆盖到载玻片上。
6.1.4 轻轻调整爬片位置，在玻片上摆正。
Tips1：一定不能保留气泡，要用镊子或枪头把气泡处理掉。
本文内容：
清洗染料——注入后固定液——擦拭封片剂——清洗固定液——吸掉水珠
5.1 清洗染料
每一个湿盒上面附有水蒸气，对湿盒进行染料清洗
5.1.1 沿着小皿侧边加入PBS缓冲液
5.1.2 用镊子把制样伴侣夹出来
5.1.3 重复快洗两次（染料不用清洗 5min）
清洗用具：
制样PBS和无菌水。
Tips1：无菌水、PBS必须使用严格无菌无内毒素的，PBS溶液的PH值需准确。
Tips2：加入PBS缓冲液，制样伴侣会自己飘起来。
Tips3：在小皿边缘加PBS溶液，不要对着中间有细胞的区域冲洗。
Tips4：加入PBS溶液后再用镊子夹起制样伴侣。
Tips5：用镊子挑边儿，夹出制样伴侣，不要触碰到细胞爬片以免划伤细胞。
🔬 实验名称：高保真固定液与 4 种封片剂对微丝结构细节保存的影响 🎯 本章内容：清洗、滴染料、贴膜、孵育过夜 固定完成后，进入免疫荧光标记阶段：清洗、滴染料、贴膜、喷盖子、倒扣小皿、4℃ 过夜孵育。一、用 PBS 快洗固定后的样品 3 遍，PBS 质量要求，无菌、新鲜、pH 值准确。PBS 小份相对大桶 PBS，即用即开，更容易保持无菌无内毒素。