🔬 实验名称:高保真固定液与 4 种封片剂对微丝结构细节保存的影响
🎯 本章内容:封片环节(4 种封片剂 + 热熔胶法)
🎯 本章内容:封片环节(4 种封片剂 + 热熔胶法)
本章进入 封片环节,对比 1-4 号封片剂的操作手法,并补充干片的热熔胶法封片。下一期上机揭示不同封片技巧的成像效果。
一、一号封片剂
🧪 第一种封片剂:液态,流动性好,用枪头吸(不要用滴管,精准吸出 20 µl)。
操作步骤:
- 6.1.1 直接用枪头去吸,不要用滴管,精准吸出 20 µl,滴加在载玻片上。
- 6.1.2 大拇指和食指捏住玻片两侧,有细胞的那一面面向自己。
- 6.1.3 倒扣爬片,准备让有细胞的一面贴合封片剂。用镊子轻轻侧着放下去,让爬片与有张力的液体表面先接触,爬片就会无气泡覆盖到载玻片上。
- 6.1.4 轻轻调整爬片位置,在玻片上摆正。
💡 操作 Tips:
- Tips1:一定不能保留气泡,要用镊子或枪头把气泡处理掉。
- Tips2:封片剂加了不要耽误时间,它会自固化。
- Tips3:要预估位置留出封片空间。
- Tips4:不要很快地放下玻片,爬片掉在封片剂上会产生气泡。
- Tips5:离白色标记部分稍微远一些。
- Tips6:有细胞的一侧与封片剂贴合。





二、二号封片剂
🧪 第二种封片剂:粘稠度太高,很难用枪去吸,直接抹。
操作步骤:
- 6.2.1 擦掉枪头上脏污部分,挤出最新一股胶液。
- 6.2.2 直接抹在玻片上。
- 6.2.3 捏着玻片侧着放上去,缓缓放下去。放得太快会砸出气泡。
💡 操作 Tips:
- Tips1:不要很快地放下玻片。
- Tips2:出现气泡要挤出。
- Tips3:粘稠封片剂不太好用,容易有回弹,边缘不密封。




三、三号和四号封片剂
💡 操作要点:夹住爬片侧放,轻轻粘住滴加好的 20 µl 封片剂,镊子稍稍用力往右牵引,这样不容易出气泡。




四、干片的热熔胶法封片
干片的热熔胶法封片方法。
操作步骤:
- 6.4.1 准备好预热的热熔胶枪。
- 6.4.2 把有细胞的一面爬片倒扣在载玻片上。
- 6.4.3 需要一点点的胶从下往上推。
- 6.4.4 边旋转边顺着边缘往前推,同步协调操作。
⚠️ 如果封斜了可以用热熔胶枪热化一下,这样就可以修直了。
⚠️ 注意枪口不要对着细胞爬片,可能会烫伤细胞。尽可能一次封好。
⚠️ 注意枪口不要对着细胞爬片,可能会烫伤细胞。尽可能一次封好。
💡 有时间可以用普通载玻片和盖玻片练习。
🎯 下一期:上机揭示不同封片技巧的成像效果。





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