⭐️图像描述:整个细胞呈现出圆扇形,扁平地铺展在视野中, 细胞内的微管呈辐射状排列,连续、均匀、明亮。这是一张3D成像的2D投影图,通过颜色信息区分高度,灰色代表细胞较低的区域,橘色代表较高的区域。
⭐️标记要点:
1、培养贴壁良好、高活力且细胞体扁平的细胞。
2、微管是对温度极其敏感的细胞器。从培养箱取出到固定的全过程,必须严格避免温度波动。
3、选用适合微管的高保真固定液,防止微管解聚。
4、为使背景更干净,使用Quench试剂来抑制自发荧光。
5、使用比常规推荐浓度更高的一抗浓度去进行过饱和标记。
⭐️成像要点:
1、细胞存在异质性,要避开处于分裂期的细胞。教科书般的辐射状细胞,在一盘细胞中通常仅占5%~7%,精心挑选视野。