⭐ 图像描述：
活细胞共聚焦成像，整个细胞呈现出圆扇形，扁平地铺展在视野中，细胞间的微管呈辐射状排列，连续、均匀、明亮。这是一张 2D 共聚焦成像时间序列，自定义颜色区分亮度，绿色代表信号较高的区域，紫色代表信号较低的区域。
⭐ 标记要点：
梯度测试染料浓度，在无明显细胞毒性情况下，尽可能增加染色浓度和时间；
使用无血清培养基染色，避免血清吸附染料，降低有效染色浓度；
使用标记辅助剂增加标记效率，抑制离子泵外排细胞内的染料；
染色完毕后使用完全培养基培养”清洗”染料 6-12 小时，使细胞吐出胞内多余染料；
细胞状态和活性极其重要，需要遵循细胞培养原则养出高活力的细胞。
精选案例
⭐️图像描述：整个细胞呈现出圆扇形，扁平地铺展在视野中， 细胞内的微管呈辐射状排列，连续、均匀、明亮。这是一张3D成像的2D投影图，通过颜色信息区分高度，灰色代表细胞较低的区域，橘色代表较高的区域。
⭐️标记要点：
1、培养贴壁良好、高活力且细胞体扁平的细胞。
2、微管是对温度极其敏感的细胞器。从培养箱取出到固定的全过程，必须严格避免温度波动。
3、选用适合微管的高保真固定液，防止微管解聚。
4、为使背景更干净，使用Quench试剂来抑制自发荧光。
5、使用比常规推荐浓度更高的一抗浓度去进行过饱和标记。
⭐️成像要点：
1、细胞存在异质性，要避开处于分裂期的细胞。教科书般的辐射状细胞，在一盘细胞中通常仅占5%~7%，精心挑选视野。